western blot檢測(cè)
蛋白印跡（Western blot, WB）是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種試驗(yàn)方法，是將蛋白質(zhì)通過(guò)SDS-PAGE電泳后，再轉(zhuǎn)移到雜交膜上，然后通過(guò)抗原抗體復(fù)合物對(duì)特定蛋白質(zhì)進(jìn)行特異性檢測(cè)的方法。Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測(cè)物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體，“顯色”用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過(guò)SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝膠電泳）分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。
樣品準(zhǔn)備條件：
細(xì)胞樣品：收集細(xì)胞后放入液氮中速凍保存或速凍24 h后轉(zhuǎn)入-80 °C冰箱保存。
組織樣品：動(dòng)物組織一般取材后立即放入液氮中速凍保存，液氮凍存24 h后可轉(zhuǎn)入-80 °C冰箱保存。
所有樣品的處理和保存過(guò)程中，切忌反復(fù)凍融。
樣品運(yùn)輸條件：樣品運(yùn)輸條件根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣品的處理?xiàng)l件，可以選擇液氮或者干冰運(yùn)輸
您只需提供：
新鮮且足量的樣品（組織不少于50 mg，細(xì)胞不少于106），或提取的總蛋白（≥ 50 μl），檢測(cè)蛋白信息，一抗（包括抗體說(shuō)明書）（若無(wú)一抗，可有償使用公司備存抗體或代購(gòu)）等。
我們提供：
實(shí)驗(yàn)結(jié)果原始膠片，電子版圖片，目的條帶光密度值，完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告單等。
Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果范例圖
